Integritas merupakan salah satu bagian dari akuntabilitas yang harus dijaga sebagai budaya kerja suatu kementerian atau lembaga negara. Salah satu upaya yang dilakukan oleh Balai Besar POM di Surabaya untuk menjaga integritas adalah secara rutin melakukan verifikasi kinerja instrumen yang digunakan dalam pengujian sampel. Verifikasi ini bertujuan untuk memastikan kelayakan instrumen tersebut sebagai sarana pengujian dan kemampuannya dalam menghasilkan data yang akurat. Salah satu instrumen yang paling sering digunakan di laboratorium kimia adalah Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT). Verifikasi kinerja KCKT dilakukan secara rutin setiap 3 bulan sekali dengan parameter yang meliputi verifikasi performa pompa, autosampler, detektor, dan kolom.
Verifikasi performa pompa dilakukan untuk memastikan apakah pompa pada KCKT tersebut dapat menarik fase gerak sesuai laju alir yang telah ditetapkan. Sebagai contoh, jika laju air ditetapkan sebesar 1 ml per menit, maka pada saat pompa tersebut dijalankan, fase gerak yang dipompa melalui selang di tampung ke dalam wadah terukur dan dihitung waktu yang diperlukan untuk menampung sebanyak 5 ml fase gerak tersebut. Dengan demikian dapat dihitung laju alirnya. Perlakuan tersebut dilakukan sebanyak 5 kali. Dari data yang diperoleh dapat dihitung peyimpangannya dengan rumus (100 dikurangi rata-rata laju alir yang diperoleh) dibagi 1 dikali 100%. KCKT tersebut dikatakan masih layak digunakan jika nilai penyimpangan kurang dari 2%.
Verifikasi performa autosampler dilakukan untuk memastikan apakah autosampler dapat menginjeksikan sampel dengan volume yang akurat seusai dengan pengaturan. Verifikasi ini menggunakan data Uji Kesesuaian Sistem (UKS), di mana larutan baku sampel dengan kadar tertentu diinjek berulangkali (minimal 5 kali) kemudian dilihat waktu retensi dan area dari baku sampel tersebut. Dari data yang diperoleh dapat dihitung Standard Deviasi dan Relative Standard Deviation (RSD). Standard Deviasi merupakan nilai statistik yang menunjukkan tingkat penyebaran dari nilai rata-ratanya. Sedangkan RSD merupakan nilai koefisien variasi yang digunakan untuk menunjukkan presisi data. Nilai RSD dihitung dari Standard Deviasi dibagi dengan rata-rata waktu retensi atau area dikali 100%. Autosampler dinyatakan layak jika nilai RSD kurang dari 2%.
Verifikasi performa detektor dilakukan untuk memastikan pembacaan sampel dengan kadar zat tertentu sudah akurat. Hal ini dapat dilakukan dengan menginjeksi larutan baku linier (minimal 6) dan diperoleh persamaan regresinya (y=bx+a) di mana y = area, b = Slope, x = konsentrasi, dan a = intersep, serta nilai korelasinya (r). Selanjutnya dihitung nilai koefisien regresi (Vxo) yang merupakan ukuran standard deviasi residual dari garis regresi yang digunakan untuk mengevaluasi sejauh mana data menyebar di sekitar garis regresi. Semakin kecil nilai Vxo maka linieritas metode analisis semakin baik. Detektor dinyatakan layak jika nilai r > 0,999 dan Vxo < 5%.
Verifikasi performa kolom dilakukan melalui uji efisiensi kolom. Data yang digunakan adalah nilai Theoritical Plate (Pelat Teoritis) yang diperoleh dari hasil pembacaan sampel dengan KCKT. Pelat Teoritis diartikan sebagai tahap kesetimbangan antara dua fase, seperti fase cair dan fase uap. Semakin tinggi nilai pelat teoritisnya, maka semakin tinggi efesiensi pemisahan kolom.
Balai Besar POM di Surabaya hanya menggunakan instrumen yang terverifikasi dalam pengujan sampel dan senantiasa berupaya menjaga integritas pengujian sebagai bagian dari Fungsi Pengawasan Badan Pengawas Obat dan Makanan.
Penulis : Aisyahtra
Penyunting : Rizca DJ & Arvita
